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fieldtest是什么意思?用法、例句,旷场实验(Open field test)详解——课堂笔记1

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Hall于1934年首先提出用旷场实验(又称敞箱实验)研究大鼠的情绪变化,经过不断的发展和完善,目前旷场实验主要用来观察实验动物的自主运动能力、对新异环境的探索行为、紧张度、躁狂、焦虑以及抑郁行为,由于其操作简单、可行性高、数据记录准确等特点,已成为研究动物精神领域较为流行的行为学测试方法。

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当实验动物罹患认知功能障碍时其探索行为将受到影响,因此,旷场实验还可对动物的认知功能进行评估。在麻醉学基础研究领域中,旷场实验广泛应用于围手术期神经认知障碍模型小鼠或大鼠的行为学测试,大多数研究主要将其作为评判实验动物运动能力的一项检测指标。旷场实验干扰因素隐匿性强、实验参数多、分析组合相对复杂,不同研究中采取的旷场实验装置构成亦不相同,了解旷场实验流程、干扰因素、参数的选择和意义,对于实验动物的行为学判读具有重要意义。本文就旷场实验的装置构成、实验程序、观察指标、参数分析以及鼠的特性对旷场实验的影响进行综述。

目前广泛应用的旷场实验装置主要由旷场反应箱和数据自动采集、处理系统两部分组成,数据自动采集、处理系统主要由录影机和跟踪系统软件构成,可监测实验动物运动轨迹等;基于不同实验设计,旷场反应箱装置有所不同,如在旷场形状、面积、材质、内壁颜色等方面不尽相同,见表1。旷场内可以不放置任何物体,也可放置不同颜色和形状的柱状物、平台、坑道等,以观察实验动物对外界新物体刺激之间的关系,目前大多数研究不再设置障碍或放置物体,但可利用旷场实验的装置,通过放置物体进行新物体识别和记忆实验。因此,在进行旷场实验时应根据不同的实验设计选择不同的旷场类型和装置。

旷场实验环境应隔音,光强度、温度和湿度适宜且保持一致。一般程序是在安静环境中,实验动物被放于旷场反应箱中,任其自由活动,指定时间内通过数据自动采集、处理系统记录以下指标:水平得分、垂直得分、中央格/周围格停留时间、修饰次数以及排便次数、中央格运动距离、周围格运动距离、运动速度和静止时间等。

实验结束后,对旷场反应箱底部、放置物以及侧壁进行彻底清洁,以免本次动物余留的信息(如动物的大小便、气味)影响下次测试结果,大部分研究采用乙醇进行清洁,乙醇浓度亦各不相同,见表1。在测试下一只动物前须让乙醇完全挥发,如应用95%乙醇,挥发时间可能需要5~10min。实验前应使动物适应周围环境30~60min,以消除新环境引起动物的好奇心和焦虑。有研究指出,旷场实验开始前也应将动物放置于旷场中适应2min,或适应10min。实验过程中严格控制时间及环境变量,避免暴力操作等造成动物应激的因素。实验过程中应保证受试动物不能看到研究人员,以免对动物的行为产生影响。

前各项研究应用旷场实验探究鼠行为学的一般程序基本一致,但具体细节不尽相同,如最初将鼠放入旷场反应箱中,有的研究者是将鼠放在旷场反应箱的正中央,也有研究者将鼠面朝墙放入周围格中,或面朝墙放置于角落中,或面朝中央格放置于某一角落中,亦可放置于旷场反应箱的任何角落,但不管采取何种方式应当确保每只小鼠或大鼠放置位置一样,放在同一格、同一方向,同时要背向研究人员。另外,对于动物在旷场实验箱中的观察时间亦不尽相同,见表1。

鼠喜欢群居和穴居,开放的旷场实验使鼠从群体中分离,并且环境相对开放,以上两个因素可以引起鼠的焦虑。研究显示啮齿类动物对旷场环境表现出明显的厌恶。因此,对于鼠的旷场实验应当考虑到相关焦虑因素对观察结果的影响。

鼠具有趋触性,这使得比起旷场的中央部分,它们更喜欢在旷场的周边或角落活动。鼠的趋触性主要取决于触觉,小鼠去掉触须后失去了与反应箱墙壁的触觉接触,也就不再有趋触性,这警示我们建立动物模型时应避免损害其感觉器官。有研究表明,当小鼠焦虑情绪增加时,这种趋触性更为明显。

光照条件对鼠的生物节律和活动度有影响。鼠在暗环境中的活动度较强,因此,在不研究光照对鼠活动性的前提下,旷场实验应在避光环境中进行。亦有研究在明亮环境下进行旷场实验。目前部分研究直接指出的实验光照强度有100、150lux和165lux,当然,这也应结合所采用视频分析系统的色彩区别阈值进行设定。整个旷场区域亮度应保持一致,除特殊实验目的外不应出现明暗不一致的区域。鼠的活动度呈现昼夜节律变化,上午(9:00~11:00)和傍晚(18:00~20:00)活动度高。

不同性别的啮齿类动物行为学表现不同。目前用于实验研究的啮齿类动物均为模式动物,其与自然繁殖的动物不同,过早的处于母幼分离环境中,研究发现对于早期处于母幼分离的雌性小鼠,其成年后社交行为和焦虑情绪增加,雄性小鼠在社交行为和焦虑情绪上没有变化,但其运动和探索能力受到显著影响。

不同品系的动物在旷场实验中表现出不同的焦虑和自主运动能力。这可能与遗传因素有关,如C57BL/6小鼠相比BALB/c小鼠在旷场实验中具有较强的探索行为能力,而BALB/c小鼠却更多地表现出焦虑行为;C57BL/6小鼠相比于DBA/2J小鼠,其中央格的运动距离升高。因此,利用旷场实验对特定行为参数和特定物种进行研究时,应该基于研究对象实验基线进行比较。

此外,大鼠的抑郁情绪可以像人类一样影响同类,将正常大鼠和抑郁模型大鼠共同饲养5周后,正常大鼠表现出明显的抑郁,而抑郁模型大鼠抑郁症状减轻,说明抑郁情绪可以在大鼠中相互影响。因此,在进行旷场实验时应该重视上述特性对实验结果的影响,最大程度上将影响旷场实验结果的干扰因素降到最小。

文章来源:青岛大学附属青岛市市立医院麻醉科董瑞毕燕琳王明山老师发表的《旷场实验在鼠行为学研究中的应用》

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